給予IL-6阻斷劑后得到緩解，隨后又進行了第二次CART注射，第二年骨髓內CLL為陰性，第三年骨髓中仍可

              檢出CART細胞，到第五年CLL并未復發

                        細節 – 多方法、多角度、長時間：監測血液中CAR基因拷貝數、細胞因子、腫瘤細胞數目，CT在宏觀水

                 平上監測腫瘤細胞（支撐文檔里還有細胞水平的數據，如CART細胞數目變化曲線、血細胞計數等，略）

                         對于這個病人來講CR是個好事情，但對于研究者來講，還需要挖掘CR背后的事情，所以對TCR進行了測序，發

                 現第二次注射CART后出現了一占比很高的克隆

                基因層面確定出現一“強勢”克隆，細胞層面檢測也確證出現了這一單一的TCR克隆，且是伴隨CAR的表達上調出現的

                            CAR基因都是隨機整合進基因組的，以往的病例中并未沒有這種“強勢”單一克隆出現，因此對克隆多樣性隨

                      時間的變化進行了分析：120天左右時這一單克隆最高 - 和CART治療進展存在關聯

“強勢”克隆的CAR基因整合到了TET2基因片段中

CAR序列的插入使得TET2發生了突變：1978位的谷氨酸變成了谷氨酰胺

CAR插入引起TET2突變，突變的TET2酶活性降低（調節去甲基化）

TET2參與調節去甲基化，而甲基化參與基因表達的表觀調控，因此作者做了測序（ATAC-seq），分析染色質

的“可接近性”

表達CAR的細胞（TET2突變細胞）細胞周期、T細胞受體相關基因“打開”

表達CAR的細胞（TET2突變細胞）細胞分化相關基因“關閉”

表達CAR的細胞（TET2突變細胞）細胞因子IFNγ的基因出現“關閉”趨勢

對細胞亞型進行分析，發現表達CAR的細胞（TET2突變細胞）分化的確受到了抑制（和ATAC-seq一致），主

要為Central memory亞型

驗證有病人樣本分析出的結論：敲低TET2可重現病人樣本細胞分化受限的現象

盡管分化受限，但其接受抗原多次重復刺激后增殖能力變強

盡管分化受限，但TET2敲低細胞接受抗原多次重復刺激后細胞因子生產能力更強

盡管分化受限，但TET2敲低細胞細胞毒性更強

 
       跳出來看，這篇文章其實挺“偷懶”的 - 只是把CART臨床試驗取得的樣本進行了又一次挖掘，分析數據，得到初步結論，再返回去測其他指標或者設計小實驗進行驗證。方法、工具都沒什么新奇的，厲害的是人家不被現有概念、定義束縛，充分利用數據、樣本的“思維底層”！真的是：技術和發現就在那里，決定高度的是你能看多遠！
       再發散一下：這篇文章挖掘的是臨床試驗的數據、樣本，其實在醫院日常的臨床工作中，我們的醫生拿到的是數量巨大、背景清晰的人類樣本，可目前這些樣本只局限用于檢測某些疾病相關指標，其他指標并未去挖掘，比如可以測序看基因組、質譜看蛋白質組，將這些指標和病人的背景信息進行關聯，從積累的大數據中不知道會得到什么驚喜！